2024-10-11
EasyPlate™磁极EasyPlate™ EasySep™ Magnet#18102专为处理少量细胞(每孔最多2x10^7个细胞)进行细胞分选操作而设计。EasyPlate™EasySep™Magnet产生高梯度磁场，其强度足以分离使用EasySep™D磁珠标记的细胞。EasyPlate™EasySep™磁体设计用于容纳圆底非组织培养处理的96孔板。
下面以EasySep™ Mouse B Cell Isolation Kit#19854 为例，简述使用EasyPlate™磁极搭配96孔板进行免疫磁珠分选的步骤。
1. 将小鼠脾脏样本机械研磨，过筛，处理为单细胞样本，并重悬在EasySep™ Buffer #20144中；
2. 使用有核细胞计数液（3% Acetic Acid + Methylene Blue, 100mL#07060）进行有核细胞计数，将样本调整为1 x 10^8个有核细胞/mL的细胞悬液，并转移至96孔板中，每孔体积在0.05 - 0.2 mL之间。记录此时每孔的样本体积V（mL）；
3. 向样本中按照20 µL/mL x V（mL）的体积加入FcR Blocker进行封闭；
4. 向样本中按照50 µL/mL x V（mL）的体积加入EasySep™ Mouse B Cell Isolation Cocktail进行抗体孵育，用枪头吹吸混匀，室温静置孵育10min；
5. 涡旋振荡EasySep™ Streptavidin RapidSpheres™ 50001磁珠30s，确保磁珠无结团；
6. 向样本中按照75 µL/mL x V（mL）的体积加入磁珠，用枪头吹吸混匀，室温静置孵育2.5min；
7. 添加EasySep™ Buffer，将样本定容至每孔0.25mL。轻轻上下吹吸2-3次来混匀。将96孔板置于EasyPlate™磁极上，室温静置孵育2.5min；
8. 小心地吸出（切勿倾倒）富集的细胞悬液至一个新的试管或96孔板。切勿触碰到孔板底部的细胞沉淀。分选后的细胞即可应用于下游实验。
